聚合酶

“面对这一难题，我们经过持续摸索，最终建立了适用于CCHFV聚合酶的表达纯化体系，并成功获得了具有RNA合成活性的病毒聚合酶。

CCHFV的L蛋白由近4000个氨基酸组成，属于布尼亚病毒目中已知最大的病毒聚合酶之一——相比之下，大多数其他布尼亚病毒聚合酶仅约2300个氨基酸。

“帽抢夺”是布尼亚和流感病毒启动转录的一种常见策略——病毒聚合酶利用其内切酶（Endo）结构域，从宿主细胞mRNA上切割下一段带有5′帽结构的短片段，作为自身mRNA合成的引物。

作为一种核苷类似物，2FC可被病毒聚合酶误认为是天然底物而掺入新生RNA链。

值得关注的是，CCHFV聚合酶展现出区别于其他布尼亚病毒聚合酶的独特结构特征。

此外，在广谱抗病毒策略方面，CCHFV聚合酶与汉坦病毒、安第斯病毒等其他布尼亚病毒聚合酶，乃至流感病毒聚合酶，均具有较近的进化起源关系，在结构与功能上存在诸多共性。

论文共同第一作者、广州健康院博士研究生潘海内介绍，在充分理解病毒聚合酶精细结构的基础上，研究团队系统解析了两类代表性抗病毒分子的作用机制。

这一发现揭示了大型病毒聚合酶维持高效率复制的独特调控模式。

通过解析2FC终止状态聚合酶延伸复合物的高分辨率结构，研究团队揭示了其“转位后链终止”的抑制模式——即药物掺入并完成转位后，滞留在聚合酶活性中心的-1位点，阻止下一个核苷酸的接入，相当于给病毒“复印机”踩下了刹车。

论文共同第一作者、广州健康院博士研究生潘海内介绍，在充分理解病毒聚合酶精细结构的基础上，研究团队系统解析了两类代表性抗病毒分子的作用机制。

在药物研发层面，该研究验证了CCHFV聚合酶是病毒生命周期中的关键弱点和可靠药物靶点，并明确了RNA合成活性中心与内切酶活性区域等具备开发潜力的功能位点。